Question

【題目】HIV（艾滋病病毒）為逆轉錄病毒，而逆轉錄酶缺乏校正修復功能，因而HIV的變異頻率非常高。因此，研制安全、有效的疫苗是控制HIV傳播的重要手段之一。請根據(jù)相關知識回答下列問題：

（1）科學工作者利用轉基因技術研制 HIV疫苗取得了一定進展，下圖是該技術的操作簡要路徑（①②③表示操作步驟）：

圖中②表示_________________，目的基因的載體有__________________（答出三種）， 目的基因_______________________的過程稱為轉化。要檢測目的基因是否插入酵母菌的DNA，可采用___________________技術，利用探針檢測酵母菌的基因，如果出現(xiàn)___________，就表明目的基因已插入酵母菌DNA中。

（2）在基因工程中將重組質粒導入不同的受體細胞可采用不同的方法，若是導入植物細胞，采用最多的方法是______________________，若是導入大腸桿菌，一般情況下，需要制備感受態(tài)細胞，原因是____________________________________________。

Answer 1

【答案】基因表達載體的構建 質粒、噬菌體、動植物病毒、噬菌體衍生物等 進入受體細胞并維持穩(wěn)定和表達 DNA分子雜交 雜交帶 農桿菌轉化法 未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA）的能力極弱

【解析】

基因工程的操作步驟：獲取目的基因、基因表達載體的構建、把目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和鑒定。據(jù)圖分析，①是通過逆轉錄的方法獲取目的基因的過程，②是基因表達載體的構建過程，③是將目的基因導入受體細胞的過程。

（1）根據(jù)以上分析已知，圖中②表示構建基因表達載的過程；在基因工程中使用的載體有質粒、噬菌體衍生物、動植物病毒等；目的基因進入受體細胞并維持穩(wěn)定和表達的過程稱為轉化。要檢測目的基因是否插入受體細胞內的DNA上，常用的檢測方法是采用DNA分子雜交技術，即利用含有放射性同位素標記的含目的基因的DNA片段做為探針檢測受體細胞的基因，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因已插入受體細胞DNA中。

（2）將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法，農桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質粒上的T-DNA轉移到受體細胞；大腸桿菌屬于微生物，由于未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA）的能力極弱，因此作為受體細胞需要經過鈣離子處理使其處于感受態(tài)，使之更容易吸收周圍環(huán)境中的DNA