Question

【題目】某興趣小組為了探究酵母菌種群數(shù)量變化規(guī)律，做了如下實驗：

實驗器材與試劑：菌種、現(xiàn)制的馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板（2 mm×2 mm方格）、滴管、顯微鏡等。

實驗步驟：

①取相同試管若干支，分別加入10 mL肉湯培養(yǎng)液（或馬鈴薯培養(yǎng)液），分別標記1、2、3等。

②將酵母菌母液分別加入試管各10 mL，搖勻后用血球計數(shù)板計數(shù)起始酵母菌個數(shù)（N0），做好記錄。

③將各試管放入冰箱中培養(yǎng)7天。

④每天同一時間各組取出本組的試管，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。

實驗記錄及計算結(jié)果如下表：（單位：個）

天數(shù)	1	2	3	4	5	6	7
觀察值						M6
計算值						N6

實驗探討：

（1）實驗步驟中有兩處錯誤，請指出并修改：

①________________；

②_________________。

（2）用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)時，取適量培養(yǎng)液后的操作是______________。

（3）觀察值是血球計數(shù)板上若干方格內(nèi)的酵母菌數(shù)的平均值，對于壓在方格界限上的酵母菌的處理方法是___________。如果計數(shù)時，蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0．1 mm，第6天吸取的培養(yǎng)液稀釋10倍后，進行計數(shù)時觀察值為M6，請推導出10 mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)N6約為______個。

（4）本探究實驗需要設(shè)置對照嗎?____________，理由是___________________。

Answer 1

【答案】缺少滅菌環(huán)節(jié)，在接種前應(yīng)將肉湯培養(yǎng)液（或馬鈴薯培養(yǎng)液）經(jīng)高壓蒸汽滅菌并冷卻后備用 不能在冰箱中培養(yǎng)，應(yīng)置于適宜溫度下（比如28℃）培養(yǎng) 先將蓋玻片放到計數(shù)室上，將培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入 只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù) 2．5M6×105 不需要 本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只需分組重復(fù)實驗，獲得平均值即可

【解析】

探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間變化關(guān)系的實驗原理：

（1）酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況.

（2）利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數(shù)目，所以一般用于單細胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細胞數(shù)目來計算單位體積的細胞的總數(shù)目。

（1）實驗步驟中有兩處錯誤：①缺少滅菌環(huán)節(jié)，在接種前應(yīng)將裝有5mL肉湯培養(yǎng)液（或馬鈴薯培養(yǎng)液）塞上棉塞，經(jīng)高壓蒸汽滅菌并冷卻后備用；②不能在冰箱中培養(yǎng)，應(yīng)置于適宜溫度下（比如28℃）培養(yǎng)。

（2）用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌個數(shù)時，取適量培養(yǎng)液后的操作是先將蓋玻片放到計數(shù)室上，將培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入。

（3）觀察值是血球計數(shù)板上若干方格內(nèi)的酵母菌數(shù)的平均值，對于壓在一個方格界限上的酵母菌應(yīng)該只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。每個小方格的體積=2×2×0.1=0.4立方毫米，共有酵母菌10×M6個細胞。10mL培養(yǎng)液中酵母菌的個數(shù)=10×1000×10×M6÷0.4=

2.5M6×105個。

（4）本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組重復(fù)實驗，獲得平均數(shù)值即可，不需要設(shè)置對照實驗。